ELISA、WB、Q-PCR采樣及取樣注意事項(xiàng)

ELISA取樣及運(yùn)輸注意事項(xiàng)

一、血清提取方法：

1.全血促凝管取血，輕輕顛倒兩三次，放置片刻讓全血凝固，凝固后3000轉(zhuǎn)15-30min離心取上清。

2.全血普通EP管取血，室溫放置2h左右，讓其凝固，凝固后3000轉(zhuǎn)15-30min離心取上清。

特別注意：取血清避免震蕩，以防止溶血，溶血會(huì)對(duì)結(jié)果有影響。

二、樣本取量及運(yùn)輸

每個(gè)指標(biāo)做單孔檢測(cè)，一個(gè)樣本需取血清30ul，3個(gè)復(fù)孔需90 ul，冰盒-20度中短時(shí)運(yùn)輸（小鼠建議采取摘眼球取血，如果血樣有限在試驗(yàn)方案允許的前提下可以取多只小鼠血樣混合）。

三、樣本編號(hào)

樣本標(biāo)號(hào)：

組別及樣本標(biāo)號(hào)，要在管壁上標(biāo)注清晰，特別注意6，9的區(qū)分，可以使用英文標(biāo)注。切記提供我司樣本清單。

WB、Q-PCR取樣及運(yùn)輸注意事項(xiàng)

一、細(xì)胞收集及保存

1、貼壁細(xì)胞胰酶消化后900轉(zhuǎn)5min離心至管底（非貼壁細(xì)胞直接離心），棄上清，將細(xì)胞凍存與-80度長期保存，-20度，暫時(shí)保存。若用于Q-PCR盡量使用滅菌無RNA酶離心管，trizon或RNA樣本保存液中-80度長期保存。

2、組織樣本取樣后立即-80或者液氮保存。后續(xù)用于Q-PCR的取樣后立即存于液氮或者-80度環(huán)境中，或者放于有trizon或RNA樣本保存液的滅菌無RNA酶離心管中-80度保存。

二、樣本運(yùn)輸

短時(shí)2h左右冰袋或者液氮運(yùn)輸，干冰（干冰可以維持-70度）密封郵寄運(yùn)輸。

三、樣本編號(hào)

樣本標(biāo)號(hào)清晰，切記提供我公司樣本清單。

病理實(shí)驗(yàn)取樣及實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)

1、動(dòng)物組織提取后（玉米粒大小即可）迅速保存于4%多聚甲醛中固定，管體標(biāo)號(hào)，組織塊盡量少帶血液，或可以用多聚甲醛將樣本稍作清洗，常溫保存，常溫運(yùn) 輸。做電鏡的樣本由2.5%戊二醛固定于15ml離心管內(nèi)，樣本直徑小于2mm，常溫保存常溫運(yùn)輸。提供我公司樣本清單。

2、細(xì)胞樣本制作成爬片后PBS浸潤保存與細(xì)胞培養(yǎng)板內(nèi)，密封常溫運(yùn)輸。做電鏡的細(xì)胞離心收集好后2.5%戊二醛固定，常溫運(yùn)輸。